Melhore a performance do seu ELISA

O ensaio de ELISA é provavelmente um dos protocolos qualitativos e quantitativos mais usados no mundo, sendo de simples execução, relativo baixo-custo e com excelente retorno em termos de dados. Entretanto, mesmo sendo um ensaio de execução relativamente simples, certos cuidados devem ser tomados:

Elementos a serem avaliados pré-ensaio:
• Concentração esperada do seu analito (sensibilidade do kit e range da curva)
• Tipo de leitor de placa (colorimétrico, quimioluminescente, etc…)
• Tipo de kit a ser comprado (Completo? Alta Sensibilidade?)
• Apresenta reação cruzada? Com quais moléculas?
• Precisa de um kit auxiliar, no caso de kits compostos apenas pela curva padrão, estreptavidina-HRP, anticorpos de captura e detecção (nível de experiência com o ensaio)?
• Especificidade correta do kit.

Diretrizes que devem ser sempre respeitadas:
• Sempre, sempre, sempre seguir as orientações do fabricante (manual)!
• Deixar todos os reagentes do kit e amostras que serão usadas, em temperatura ambiente antes de começar (30-45 minutos).
• Durante o preparo dos reagentes, evitar a formação de bolhas.
• Proteger da luz direta todos os reagentes, em especial os fotossensíveis (TMB).
• Seguir boas práticas de pipetagem e usar pipetas adequadas e calibradas.
• Seguir a tabela/figura dada no folheto de instruções para diluição da curva (praticamente todos os kits comerciais oferecem orientação para a diluição da curva padrão). Caso não seja adquirido kit auxiliar sugerido pelo fabricante:
• Atentar-se para o BSA usado. Deve ser sempre de alto grau de pureza e livre de proteases e outras substâncias;
• Seguir instruções do manual para preparo dos tampões e se possível. Sempre que possível, adquirir os reagentes auxiliares recomendados;
• Sempre correr a placa com a CURVA PADRÃO em DUPLICATA!

Conte sempre com o Time de Suporte Pensabio para qualquer auxílio em sua pesquisa.

Conheça também os Diferentes tipos de ELISA.